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藥物研發(fā)：在新藥篩選和藥物毒性評(píng)估中，CCK-8 細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒被廣泛應(yīng)用。例如，在抗腫瘤藥物研發(fā)過(guò)程中，科研人員將不同濃度的候選藥物作用于腫瘤細(xì)胞系，一定時(shí)間后加入 CCK-8 溶液檢測(cè)細(xì)胞活力。通過(guò)計(jì)算藥物對(duì)細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度（IC50），評(píng)估藥物的抗腫瘤活性和毒性，為藥物研發(fā)提供重要數(shù)據(jù)支持，篩選出具有潛力的候選藥物。
細(xì)胞生物學(xué)研究：在細(xì)胞增殖、分化、凋亡等基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研究中，該試劑盒用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞狀態(tài)。如在干細(xì)胞分化研究中，使用 CCK-8 檢測(cè)不同誘導(dǎo)條件下干細(xì)胞的活力變化，判斷細(xì)胞是否成功分化以及分化過(guò)程中細(xì)胞活力的動(dòng)態(tài)變化，為揭示細(xì)胞分化機(jī)制提供依據(jù) 。
毒理學(xué)研究：在評(píng)估化學(xué)物質(zhì)、環(huán)境污染物等對(duì)細(xì)胞的毒性作用時(shí)，CCK-8 法是常用的檢測(cè)手段。例如，檢測(cè)重金屬離子對(duì)肝細(xì)胞的毒性，將肝細(xì)胞暴露于不同濃度的重金屬溶液中，利用 CCK-8 試劑盒檢測(cè)細(xì)胞活力，確定重金屬的毒性劑量和作用機(jī)制，為環(huán)境安全評(píng)估和毒理學(xué)研究提供數(shù)據(jù)。
使用方法
細(xì)胞接種：將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞消化后，用培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度，接種到 96 孔板中，每孔加入適量細(xì)胞懸液，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
藥物處理（如需）：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，向孔中加入不同濃度的藥物或處理因素，繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間。
CCK-8 檢測(cè)：向每孔加入適量 CCK-8 溶液，輕輕混勻后，將 96 孔板放回培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時(shí)（具體時(shí)間根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)條件確定）。
吸光度測(cè)定：使用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算細(xì)胞活力和細(xì)胞數(shù)量。
注意事項(xiàng)
試劑儲(chǔ)存：CCK-8 試劑盒應(yīng)避光保存于 4℃冰箱，避免反復(fù)凍融，否則會(huì)影響試劑活性。
操作規(guī)范：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則，避免污染。加入 CCK-8 溶液時(shí)，避免產(chǎn)生氣泡，以免影響吸光度測(cè)定。
干擾因素：某些具有還原性的物質(zhì)可能會(huì)與 WST-8 發(fā)生反應(yīng)，影響檢測(cè)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)前需評(píng)估樣品中是否存在此類(lèi)干擾物質(zhì)，并進(jìn)行相應(yīng)處理。
對(duì)照設(shè)置：實(shí)驗(yàn)中應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照（只含培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液）、陰性對(duì)照（正常培養(yǎng)的細(xì)胞）和陽(yáng)性對(duì)照（已知具有細(xì)胞毒性或促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)作用的物質(zhì)處理的細(xì)胞），確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性 。
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