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SDS-PAGE 一步法凝膠快速制備試劑盒

更新時間:2025-06-27      點擊次數(shù):100
在使用 SDS-PAGE 一步法凝膠快速制備試劑盒時,還能從實驗設計、儀器配合、廢物處理等角度挖掘更多實用技巧,助力實驗高效開展:


  • 實驗設計巧規(guī)劃

    • 梯度凝膠預實驗:若不確定目標蛋白最佳分離濃度,可利用試劑盒少量試劑制作梯度凝膠進行預實驗。先將不同濃度凝膠溶液分層灌注,待聚合后進行電泳,通過預實驗快速確定分離的凝膠濃度,節(jié)省正式實驗時間和試劑用量。

    • 多膠同步制備:當需同時處理多個樣品時,根據(jù)試劑盒規(guī)格和電泳槽容量,可一次配制多份凝膠溶液,同時灌注多個凝膠。但要注意記錄好各凝膠對應的樣品信息,避免混淆。如進行蛋白質(zhì)組學差異表達分析,一次制備多個凝膠,可同步分析不同樣本,提高實驗效率。

  • 儀器配合提效率

    • 恒溫設備輔助:在環(huán)境溫度不穩(wěn)定的情況下,使用恒溫平臺或水浴鍋保持凝膠溶液和電泳槽溫度恒定。如在寒冷環(huán)境中,將混合好的凝膠溶液放在 30℃恒溫平臺上,可加快凝膠聚合速度且保證聚合均勻性,避免因溫度過低導致的聚合異常。

    • 離心機妙用:混合凝膠溶液后,若溶液中仍有少量難以排出的氣泡,可將盛放溶液的容器放入離心機,以低速(如 1000 - 2000 rpm)離心 1 - 2 分鐘,使氣泡集中到溶液表面,方便去除。

  • 細節(jié)把控保質(zhì)量

    • 溶液預過濾:若懷疑預混試劑或添加的去離子水、緩沖液存在雜質(zhì),可使用 0.22μm 或 0.45μm 的濾膜對溶液進行過濾后再配制凝膠。尤其在對條帶清晰度要求的實驗中,過濾操作能有效去除可能影響蛋白質(zhì)遷移的微小顆粒,提高凝膠質(zhì)量。

    • 加樣孔修復:若拔梳子時不慎損壞加樣孔,可在電泳前用少量未聚合的凝膠溶液對破損處進行修補。用微量移液器吸取凝膠溶液,小心滴加到破損加樣孔處,待其聚合后,可一定程度恢復加樣孔形狀,減少對樣品加樣和電泳結(jié)果的影響。

  • 廢物處理有講究

    • 試劑回收利用:試劑盒中未使用完且未受污染的試劑,如緩沖液等,可按照要求妥善保存,用于后續(xù)實驗的清洗或其他輔助步驟。但要注意,已混合的凝膠溶液不可回收,避免污染其他試劑。

    • 環(huán)保處理:實驗產(chǎn)生的廢棄凝膠和試劑,需按照實驗室危險廢物處理規(guī)定進行分類處置。聚丙烯酰胺凝膠雖低毒,但不可隨意丟棄,應收集后進行無害化處理;含 SDS 等化學試劑的廢液,需倒入指定的化學廢液收集容器,統(tǒng)一交由專業(yè)機構(gòu)處理,防止環(huán)境污染。



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